多模式层析填料在胶原蛋白纯化中的应用
博格隆的多模式层析填料兼具离子交换作用、疏水作用和氢键作用机制,表现出优秀的分辨率,又因其独特机制能够耐受较高电导的样品上样,常用于酵母或动物细胞培养上清中的重组胶原蛋白纯化,以及大肠杆菌破碎液中胶原蛋白的高效分离。本文聚焦博格隆多模式层析介质在重组胶原蛋白纯化中的应用。
胶原蛋白层析介质选择策略

Fig.1 胶原蛋白层析介质选择策略
多模式介质MMC系列产品介绍
博格隆MMC系列产品包括Diamond MMC和Diamond MMC Mustang,下表列出了两款填料的技术参数:
Table 1. Diamond MMC和Diamond MMC Mustang技术参数

对比两款MMC产品参数,Diamond MMC粒径大、离子载量高,适用于澄清料液中胶原蛋白的纯化;Diamond MMC Mustang粒径小,具有更高的分辨率,可用于需去除胶原蛋白降解片段的粗纯或精纯步骤。两款填料均具备耐高盐上样的特点。
应用案例
• 案例1: Diamond MMC纯化酵母表达III型胶原蛋白
样品:电导35.16mS/cm,pH3.0

Fig.2 Diamond MMC层析纯化图谱
在此案例中,目标分子有较严重的降解,经过优化洗杂和洗脱电导和pH条件,最终去除降解片段和杂质蛋白,获得纯度94.95%重组胶原蛋白组分。
• 案例2: Diamond MMC Mustang纯化酵母表达XVII型胶原蛋白
样品:用水稀释2倍,调节电导为21.23mS/cm,pH4.0


Fig.3 Diamond MMC Mustang层析纯化图谱
在本案例中,上样电导高达21.23mS/cm,无目标蛋白流穿;经两步洗杂效果明显,最终通过盐线性梯度洗脱,获得高纯度重组胶原蛋白。
总结
多模式层析介质凭借其多种作用机制,具有耐高盐上样和高分辨等特点,适用于重组胶原蛋白的一步层析工艺设计,或两步层析中的精纯实现高纯度胶原蛋白生产。随着重组胶原蛋白产业发展,博格隆多模式层析介质以其高效、灵活的特点,将在其中扮演重要角色。
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