如何快速成为博格隆BXP柱装柱达人?
之前的推文中,我们介绍了BXK实验室型层析柱的装柱流程,不少老师在后台交流了实验室装柱过程中遇到的实际问题。
实际上,实验室层析柱获得良好柱效,不仅取决于填料本身,柱体结构、柱头设计以及装柱细节,同样会直接影响柱床稳定性和实验重复性。
相比BXK系列,BXP系列实验室层析柱具有更高的耐压性能、灵活的双柱头设计,广泛适用于中低压层析工艺开发及较高流速装柱应用。
本篇结合BXP层析柱的结构特点,对几个容易忽略的装柱细节进行说明,希望帮助大家更加高效、稳定地完成实验室装柱。
BXP层析柱的特点
BXP系列实验室层析柱属于中低压层析柱,目前规格包括10 mm和16 mm两种内径。柱体采用高精度玻璃管与POM工程塑料制造,具有良好的生物相容性及化学耐受性,适用于绝大多数水相体系。其具有双柱头配置,使得装柱高度有更灵活的空间。耐压对比BXK低压柱更高,耐压可达到2 MPa。BXP层析柱延续了均匀液流分布、稳定管路连接等设计特点,在实验室工艺开发过程中能够提供较好的重复性。



Figure 1-3. BXP系列实验室层析柱
更高的耐压能力意味着实验室能够覆盖更大的操作窗口,在较高线速度、高黏度缓冲液或高阻力填料应用中具有更好的适应性,同时也为装柱条件优化提供了更大的调节空间。双柱头设计则为不同柱高和不同填料体积提供了更加灵活的调节空间。
BXP层析柱装柱注意事项
虽然BXP的整体装柱流程与BXK基本一致,但由于结构设计有所不同,在实际操作过程中仍有几个细节需要特别注意。
◉ 利用玻璃柱管作为装柱器
BXP层析柱没有单独配置装柱器,可将额外的玻璃柱管直接安装在柱管固定器另一端作为装柱器使用。玻璃柱管自带螺纹,可直接完成安装。
这种设计减少了额外配件,同时也保证了装柱过程中柱床能够连续形成,减少浆液转移带来的扰动。
◉ 玻璃柱管的结构特点
BXP层析柱没有亚克力外管,而采用较厚的玻璃内管设计,耐压可达到2 MPa。较高的机械强度不仅提升了承压能力,也使柱体在较高装柱流速下具有更好的整体刚性。
◉ 柱管固定器的锁止结构
柱管固定器与柱管之间设置有密封圈(容易遗失)。安装时,旋紧柱管固定器后,密封圈会锁止柱头螺纹杆,此时柱头将无法继续上下移动或旋转;随后再旋紧调节旋钮,即可完成柱头密封。如果发现柱头无法移动,建议首先检查柱管固定器是否已经锁止,而不要强行旋转柱头,以免损伤螺纹结构。
◉ 根据应用选择合适的筛板
BXP16标配10 μm筛网,也可选配23 μm筛网;BXP10标配5 μm筛板,筛板采用嵌入式安装方式。
需要注意的是,5 μm筛板由于孔径更小,更容易发生堵塞,因此建议:
● 做好样品和缓冲液过滤;
● 定期检查筛板状态;
● 发现压力异常或者装柱反复出现双峰时及时更换筛板。
更换筛板时,可使用1 mL枪头挑出旧筛板,再利用枪头辅助安装新筛板;5 μm筛板浸润液体后即可完成排气。
◉ 推荐装柱流速
推荐装柱流速主要与填料基球刚性、粒径、沉降速度及压缩行为有关,并不存在适用于所有填料的统一装柱速度。实际开发中建议优先参考推荐条件建立稳定柱床,再根据柱效、柱压及压缩情况需求进行优化。
装填博格隆不同系列填料时,可参考下表推荐装柱流速进行操作。
Table 1. 博格隆填料实验室层析柱装柱推荐流速

◉ 合理控制压缩系数
合理的压缩系数并不存在固定数值,而是在柱床稳定性、柱压和柱效之间取得平衡。实际开发过程中,应结合填料类型、柱径及柱高综合确定最佳压缩条件。
由于BXP层析柱内径较小,柱壁对柱床具有更明显的支撑作用,因此琼脂糖基填料装柱时,压缩系数可适当缩小至1.10–1.13。填料体积偏差对BXP层析柱柱高影响较大,如果需要严格按照压缩系数装填,可以先用30-60cm/h流速进行沉降。下压操作也可根据经验进行:在采用本文推荐的装柱缓冲液和流速装柱的场景下,20 cm左右的标记高度,可下压到标记高度以下1-1.5 cm的形式完成压柱。
其他
BXP层析柱整体装柱流程与BXK系列基本一致,本文重点介绍的是两者在结构设计及装柱细节上的区别。
如果您希望系统了解实验室层析柱的完整装柱流程,可参考过往推文《如何快速成为博格隆 BXK 柱装柱达人?》。