天然产物是指动植物或微生物体内的组成成分及其代谢产物,具有结构多样、性质多变、成分复杂、有效成分含量低等特点,分离纯化难度大。层析技术是利用混合物中各物质理化性质的差异达到分离目的的技术,反相层析、离子交换层析及分子排阻层析等色谱方法在天然产物分离纯化中应用广泛。
正相和反相色谱根据目的化合物的极性(疏水性)差别而达到分离目的。反相色谱固定相主要以键合硅胶为主,该类介质最大的特点是颗粒强度高、选择性好,在现代液相层析技术中应用最为广泛,适用于分离天然产物中非极性和极性较弱的化合物。除此之外,聚合物基架的介质也常作为反相填料,其表面具有烷基改性介质非极性的特征‚博格隆BestPoly系列填料由聚苯乙烯和二乙烯基苯聚合而成,依靠自身带有的高密度苯环而形成的反相层析填料,与传统硅胶基架相比,能耐受更高的pH条件,颗粒更均一,具有良好的可放大性。
凝胶色谱主要是根据化合物分子量的不同进行分离,介质为多孔的网状结构,分子越小进入介质内部越深,故在介质中的停留时间越长。Bestdex LH-20是在G25基础上用羟丙基修饰而成的,引入羟丙基后同时具备亲水性与亲脂性,可使用有机溶剂作为流动相,适用于中药有效成分的分离纯化,在分离过程中结合了凝胶过滤、分配层析、吸附层析的特点,能分离结构非常接近的分子。
离子交换层析的分离基础是不同分子间所带电荷质量和数量的差异,对于天然产物中水溶性成分如氨基酸、生物碱、有机酸及酚类化合物的分离具有很大的潜力。对于多糖纯化而言,IEX+SEC可作为首选方案,酸性多糖选用DEAE(羧基化多糖)或Q(硫酸化、磷酸化多糖)这两种配基的阴离子交换填料,而碱性多糖则考虑选用SP或CM等阳离子交换填料。
层析分离技术是制备于天然产物的主要方法之一,具有分离量大、产品纯度高等优点,在多糖、黄酮、蒽醌、甾体、萜、生物碱等各类化合物的分离纯化中展现了良好的应用前景。
2025年03月20日
2025年03月18日
2025年03月13日