新品发布 MegaPoly AT 抗体亲和分析柱
MegaPoly AT 抗体亲和分析柱为博格隆全新推出的高压液相色谱柱。
MegaPoly AT 预装有平均粒径为 20μm 的聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物填料,该填料偶联有耐碱 Protein A 配基,适用于单克隆抗体及 Fc 融合蛋白等产品的快速定量或微量制备。该方法具有方便,快速,稳健的特点,广泛应用于研发阶段的细胞培养条件筛选和生产阶段的质量控制。
主要应用
•培养条件筛选:通过对表达滴度的测定进行细胞株和培养条件的筛选
•纯化质量控制:上游料液抗体或 Fc 融合蛋白表达量测定
下游纯化后抗体或 Fc 融合蛋白含量测定
•抗体微量制备
产品特点
•高分辨率,高耐压: 平均粒径 20μm, 最大可耐受压力 20MPa,稳健,耐用。
•操作便捷,快速: 仅需几分钟即可完成一个样品测样。
•采用重组耐碱配基: 具有更强的结合能力和更广泛的适用性,可以使用 0.1-0.5M NaOH 进行CIP。
表1 MegaPoly AT 抗体亲和高压液相色谱分析柱产品参数
标品测试
人 IgG 纯品标准曲线
实验条件:
分析柱: MegaPoly AT 抗体亲和分析柱 , 2.1 mmD x 30 mmH
某进口品牌抗体亲和分析柱,柱体积 0.1mL
系统: Agilent 1200 HPLC
UV 检测: 280 nm
平衡液(A液): 50mM PB + 150mM NaCl pH 7.0
洗脱液(B液): 100mM 乙酸 pH 2.5
流速: 3 mL/min
样品: 人IgG
进样量: 20 μL IgG 标准品
浓度: 0.125 mg/mL 到 20 mg/mL
某双抗纯品标准曲线
实验条件:
分析柱: MegaPoly AT 抗体亲和分析柱 , 2.1 mmD x 30 mmH
系统: Agilent 1200 HPLC
UV 检测: 280 nm
平衡液(A液): 50mM PB + 150mM NaCl pH 7.0
洗脱液(B液): 100mM 磷酸盐 PH 2.5
流速: 1 mL/min
样品: 双抗 原样 5.04mg/mL
进样量: 20 μL
双抗浓度: 0.5 mg/mL 到 5 mg/mL
某 Fc 融合蛋白纯品标准曲线
实验条件:
分析柱: MegaPoly AT 抗体亲和分析柱 , 2.1 mmD x 30 mmH
系统: Agilent 1200 HPLC
UV 检测: 280 nm
平衡液(A液): 50mM PB + 150mM NaCl pH 7.0
洗脱液(B液): 100mM 磷酸盐 PH 2.5
流速: 1 mL/min
样品: Fc 融合蛋白,原样浓度 11.6mg/mL
进样量: 20 μL
标准品浓度: 1 mg/mL 到 10 mg/mL
人 IgG 作为标品,不同洗脱条件下的标准曲线
实验条件:
分析柱: MegaPoly AT 抗体亲和分析柱 , 2.1 mmD x 30 mmH
系统: Agilent 1200 HPLC
UV 检测: 280 nm
平衡液(A液): 50mM PB + 150mM NaCl pH 7.0
洗脱液(B液): 下列之一:
•100 mM柠檬酸, pH 2.5
•100 mM醋酸盐, pH 2.5
•100 mM磷酸盐, pH 2.5
•100 mM甘氨酸, pH 2.5
•12 mM盐酸, pH 1.9
流速: 3 mL/min
样品: 人 IgG
进样量: 20 μL IgG 标准品
浓度: 0.125 mg/mL 到 20 mg/mL
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